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富硒板黨對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶及抗氧化酶影響
【關(guān)鍵詞】 富硒板黨
恩施板橋黨參(簡(jiǎn)稱板黨)為桔�？泣h參屬植物的干燥根，因生長(zhǎng)在湖北恩施板橋鎮(zhèn)而得名，為我國(guó)名貴材，也是非常好的滋補(bǔ)品〔1〕。其根含有豐富的多糖、甾醇、甾酮、苷類、氨基酸、膽堿及微量元素如硒等，對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、血液和造血系統(tǒng)都有重要改善作用，是益氣補(bǔ)脾的上乘良藥〔2〕�，F(xiàn)代研究認(rèn)為，中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能退變是人體衰老的關(guān)鍵，并與代謝產(chǎn)生的氧自由基慢性損傷或抗氧化酶不足密切相關(guān)。本試驗(yàn)用富硒板黨注射液腹腔注射，通過(guò)對(duì)大鼠行為學(xué)觀察和組織超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH?Px)含量測(cè)定，探討富硒板黨注射液對(duì)大鼠學(xué)記憶能力及抗氧化酶的影響，進(jìn)一步探討其改善中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能的作用機(jī)制。
1 與方法
1?1 黨參注射液制備
富硒板黨［恩施板橋鄉(xiāng)中藥材生產(chǎn)質(zhì)量規(guī)范(GAP)示范基地］。采用水提醇沉法制成含生藥30％的注射液，瓶裝密封消毒備用。用雙道束原子熒光光譜法測(cè)定硒的含量為0?72?μg/ml。
1?2 藥品及實(shí)驗(yàn)儀器
氟哌啶醇注射液(湖南洞庭藥業(yè)股份有限公司)；SOD、GSH?Px試劑盒(南京建成生物工程研究所)；回避反應(yīng)箱(華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院自制)；GL?20G II型高速低溫離心機(jī)，UV?2450分光光度儀，水浴箱。
1?3 大鼠電跳臺(tái)行為學(xué)訓(xùn)練及測(cè)試
跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)參照文獻(xiàn)〔3〕進(jìn)行。末次給藥15?min后將大鼠輕放于回避反應(yīng)箱內(nèi)訓(xùn)練，適應(yīng)3?min，隨后底部銅柵通電(36V)2?s，訓(xùn)練時(shí)間為3?min。24?h后再進(jìn)行行為學(xué)測(cè)試，記錄各鼠第一次跳下平臺(tái)的潛伏期和3?min跳下平臺(tái)的錯(cuò)誤次數(shù)。
1?4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
雄性Wistar大鼠50只，鼠齡40～50周，體重300～350?g(華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心)，隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、富硒板黨高劑量組、中劑量組和低劑量組，每組10只。模型組按1?g/(kg·bw)腹腔注射氟哌啶醇注射液，富硒板黨高、中、低劑量組分別在注射氟哌啶醇的同時(shí)，按7?2，3?6，1?8?g/(kg·bw)腹腔注射富硒板黨注射液，對(duì)照組每天等量腹腔注射生理鹽水，各組用藥為2次/d注射，連續(xù)用藥7?d。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造模參照文獻(xiàn)〔4〕。
1?5 SOD、GSH?Px測(cè)定
行為學(xué)測(cè)試結(jié)束后斷頸處死大鼠，迅速取血及各種組織，血液離心取血清，組織制成10％勻漿，備用。SOD、GSH?Px測(cè)定，按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行，蛋白定量采用雙縮脲法測(cè)定。
1?6 分析
采用SPSS11?5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析(ANOVA)，計(jì)量資料用均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差表示，對(duì)不符合ANOVA的數(shù)據(jù)，用非參數(shù)(Kruskai?Wallis Test)進(jìn)行比較分析。
2 結(jié)果
2?1 富硒板黨對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響
富硒板黨各劑量組與模型組比較均能延長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)大鼠的跳臺(tái)潛伏時(shí)間，減少3?min犯錯(cuò)次數(shù)，高、中劑量尤其明顯(P<0?01)，提示富硒板黨能維持實(shí)驗(yàn)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力，見(jiàn)表1。表1 富硒板黨對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響(略)注：與模型組比較，*P<0?01，**P<0?05
2?2 富硒板黨對(duì)大鼠血及組織SOD、GSH?Px影響
富硒板黨注射液各劑量組與模型組比較均能提高血液、海馬、腦皮質(zhì)及肝腎SOD、GSH?Px表達(dá)值，高、中劑量組作用明顯(P<0?01)，見(jiàn)表2，3。表2 富硒板黨對(duì)大鼠血及組織SOD的影響(略) 注：與模型組比較，*P<0?01，**P<0?05表3 富硒板黨對(duì)大鼠血及組織GSH-Px的影響(略)注：與模型組比較，*P<0.01，**P<0.05
3 討 論
多者認(rèn)為，體內(nèi)自由基的濃度與學(xué)習(xí)記憶功能密切相關(guān)，隨著年齡的增加，由于抗氧化酶活性不斷下降，體內(nèi)產(chǎn)生的過(guò)量氧自由基無(wú)法及時(shí)清除，造成細(xì)胞代謝和功能形態(tài)的改變，導(dǎo)致細(xì)胞的衰老。SOD和GSH-Px是重要的抗氧化酶系，能清除氧自由基、降低細(xì)胞內(nèi)H2O2水平、減少自由基和過(guò)氧化物蓄積導(dǎo)致的細(xì)胞毒性作用〔5〕。肖本見(jiàn)等研究表明，富硒板黨能減弱苯異丙腺苷致小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙，對(duì)小鼠具有益智和抗氧化作用〔6〕。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，富硒板黨能減弱氟哌啶醇致大鼠的學(xué)習(xí)記憶障礙，維持實(shí)驗(yàn)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力，顯著提高實(shí)驗(yàn)大鼠血、肝、腎、海馬、腦皮質(zhì)SOD、GSH?Px的表達(dá)量，與肖本見(jiàn)等〔６〕的研究一致，說(shuō)明富硒板黨具有清除氧自由基、改善記憶抗衰老、老年性癡呆等作用。其作用機(jī)制可能與富硒板黨所含膽堿、多糖及微量元素硒有關(guān)。為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)及其應(yīng)用、健康等方面提供了學(xué)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【參考文獻(xiàn)】
〔1〕殷智.黨參商品名稱辨析［J］.湖北雜志，2001，23(11)：49-50.
〔2〕肖培根.新編中藥志［M］.北京：化學(xué)出版社，2001，1：811-812.
〔3〕H Gerhard vogel(著)，杜冠華(譯).藥實(shí)驗(yàn)指南—新藥發(fā)現(xiàn)和藥理學(xué)評(píng)價(jià)［M］.北京：科學(xué)出版社，2001：444-445.
〔4〕黃麗亞，葉嗣潁.黨參注射液上調(diào)抗氧化酶表達(dá)作用的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中國(guó)老年學(xué)雜志，2006,26(1):70-71.
〔5〕陳勤.抗衰老研究實(shí)驗(yàn)方法［M］.北京：中國(guó)科技出版社，1996：43.
〔6〕肖本見(jiàn)，譚志鑫，陳國(guó)棟，等.富硒板黨對(duì)小鼠益智和低氧/復(fù)氧損傷的保護(hù)作用研究［J］.中國(guó)衛(wèi)生，2005，21(11)：1368-1369.
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