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微生物檢測(cè)操作工個(gè)人工作總結(jié)
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自從本人接管微生物實(shí)驗(yàn)室以來(lái),發(fā)生過(guò)大大小小的實(shí)驗(yàn)室偏差,現(xiàn)在就各類(lèi)偏差現(xiàn)象談?wù)剛�(gè)人看法:
由于微生物的特殊性,微生物檢測(cè)異常結(jié)果的調(diào)查與評(píng)價(jià)較理化檢測(cè)更為復(fù)雜和困難,因?yàn)?/p>
1樣品在環(huán)境中的均一性較差(即 分布不均)
2微生物的不穩(wěn)定性--因?yàn)樗幤窓z驗(yàn)的對(duì)象是具有繁殖能力的活細(xì)胞生物,其能因存放時(shí)間的延長(zhǎng)而死亡亦或大量繁殖
3檢驗(yàn)周期長(zhǎng)--需待其形成肉眼可見(jiàn)的菌落,一般需72小時(shí)
4檢驗(yàn)過(guò)程中影響因素較多,如微生物的生理狀態(tài),樣品的抑菌性,培養(yǎng)基靈敏度,培養(yǎng)溫度
所以,盡管我們執(zhí)行檢驗(yàn)規(guī)程和sop,在實(shí)際操作中也難免會(huì)有實(shí)驗(yàn)室偏差,因此微生物實(shí)驗(yàn)室有必要制定適當(dāng)?shù)钠钐幚矸椒?
個(gè)人認(rèn)為:對(duì)于微生物實(shí)驗(yàn)室偏差,檢驗(yàn)員應(yīng)端正心態(tài),以科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度去面對(duì),切勿隱瞞(特別是超標(biāo)偏差), 當(dāng)出現(xiàn)偏差,當(dāng)事檢驗(yàn)員應(yīng)有清晰的分析思路:從一切可能的角度去調(diào)查,從而有針對(duì)性的去處理偏差,得出正確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果..實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)在接到異�；虺瑯�(biāo)結(jié)果的報(bào)告后,及時(shí)向部門(mén)經(jīng)理匯報(bào)情況,
然后按以下步驟進(jìn)行調(diào)查分析偏差原因并作出適當(dāng)處理,
1檢查所有的 玻璃儀器,工具,溶液,樣品是否正確
微生物限度檢驗(yàn)所用玻璃儀器,稀釋劑:極少會(huì)出現(xiàn)染菌現(xiàn)象, 因?yàn)槠錅缇?guī)程成熟且簡(jiǎn)便,一般可對(duì)其進(jìn)行徹底滅菌,若還是出現(xiàn)問(wèn)題,則可能是設(shè)備性能不達(dá)標(biāo)或保存過(guò)程中受到污染了.
另:如研缽等能用干熱滅菌的器皿則盡量用干熱法滅菌,因?yàn)闈駸岱缇蟮奈锲窌?huì)因帶有水蒸氣--冷凝而成少量水附著于物品表面和內(nèi)壁,若不及時(shí)將其烘干,則易滋生微生物造成不必要的污染,
2與檢驗(yàn)員討論檢驗(yàn)方法,確認(rèn)無(wú)方法和操作方面的問(wèn)題
微生物限度檢查中制備供試液所用到的乳化劑,分散劑有聚山梨酯80,十四烷酸異丙脂,其能將一些非水溶性的供試品(硬脂酸鎂)在稀釋劑里充分混勻,達(dá)到"供試液均勻一致"的效果,使被檢樣品更具代表性,為了便于觀察某些細(xì)菌,在細(xì)菌檢查培養(yǎng)基中還可加入一顯色劑,如TTC,其最終濃度為0.001%,若過(guò)高則會(huì)對(duì)細(xì)菌的生長(zhǎng)有抑制作用
在檢查抗菌藥物時(shí),可以在供試液制備過(guò)程中(或在培養(yǎng)基里)加入中和劑,其用量應(yīng)在方法驗(yàn)證過(guò)程中確定.
例1:在檢查青霉素類(lèi)藥物如 阿莫西林膠囊時(shí),則可在稀釋劑或培養(yǎng)基中加入青霉素酶,其能完全特異,迅速的使青霉素滅活,,從而使青霉素失去抑菌,殺菌的作用.
例2:在檢查喹諾**類(lèi)抗菌藥時(shí),可根據(jù)其理化性質(zhì):3,4位羧基與**羰基,容易和金屬離子如,鈣,鎂,鐵,鋅等形成螯合物降低藥物的活性.在稀釋劑或培養(yǎng)基中加入MnSO4(0.1mol/L)
3檢查在相關(guān)時(shí)間段其他樣品或同類(lèi)樣品的檢測(cè)結(jié)果 和 微生物菌落形態(tài)
也可參考當(dāng)天/當(dāng)次檢驗(yàn)其他檢品的檢驗(yàn)結(jié)果,有類(lèi)似異常情況發(fā)生,可根據(jù)所檢查微生物菌落形態(tài)作出相應(yīng)的判斷.微生物在液體培養(yǎng)基(如營(yíng)養(yǎng)肉湯,改良馬丁培養(yǎng)基)中的培養(yǎng)特征會(huì)有:形成菌膜/形成沉淀/渾濁,在固體培養(yǎng)基(營(yíng)養(yǎng)瓊脂,玫瑰紅鈉瓊脂)上的形態(tài)有:菌落表面形態(tài)—圓形,根狀,不規(guī)則形,菌落隆起形狀—隆起,扁平,凸起,臍狀凸起,菌落邊緣形狀—邊緣整齊,裂葉狀,波狀,絲狀,鋸齒狀,
舉例:金黃色葡萄球菌,在營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上,經(jīng)37度培養(yǎng)24-48小時(shí)后,產(chǎn)生金黃色脂溶性色素,呈金黃色,菌落較小,,直徑多在0.8-1.5mm之間,圓形,凸起,邊緣整齊,表面光滑,濕潤(rùn),不透明之菌落.
4潔凈室潔凈度的控制
為了維護(hù)醫(yī)藥實(shí)驗(yàn)用潔凈室環(huán)境的穩(wěn)定性,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,對(duì)潔凈室環(huán)境質(zhì)量應(yīng)采取合理的控制措施和評(píng)價(jià)方法是非常重要的無(wú)菌技術(shù)主要指在微生物實(shí)驗(yàn)工作中,控制或防止各類(lèi)微生物的污染及其干擾的一系列操作方法和有關(guān)措施,其中包括無(wú)菌環(huán)境設(shè)施無(wú)菌實(shí)驗(yàn)器材以及無(wú)菌操作等,無(wú)菌環(huán)境是指人們用物理的或化學(xué)的方法,在某一可控的空間內(nèi)使微生物數(shù)量降低到最低限度,接近于無(wú)菌的一種空間,醫(yī)藥企業(yè)中，消毒與滅菌是微生物實(shí)驗(yàn)技術(shù)中最基本的操作，消毒是指對(duì)病原微生物的繁殖體的致死作用，但不能殺死芽孢等全部微生物.所以,消毒是不徹底的,不能代替滅菌.凡用于消毒的化學(xué)藥品稱為消毒劑,其有液體的,固體的,和氣體的，消毒劑種類(lèi)很多,性質(zhì)不一,因此應(yīng)根據(jù)具體情況選擇既安全又有效的消毒劑.關(guān)于消毒劑的類(lèi)型于影響因素詳見(jiàn) 本人的PPT資料<消毒劑>.
無(wú)菌操作一般是指在無(wú)菌環(huán)境條件下,使用無(wú)菌制品或無(wú)菌器材進(jìn)行檢驗(yàn)或?qū)嶒?yàn)的過(guò)程中,能防止微生物污染與干擾的一種常規(guī)操作方法,其目的有一是保證待檢驗(yàn)物不被環(huán)境中的微生物污染,二防止被檢微生物在操作中污染環(huán)境或感染操作人員,個(gè)人認(rèn)為:藥品微生物限度檢驗(yàn)無(wú)菌操作,應(yīng)遵循"有菌觀念,無(wú)菌操作"的原則,嚴(yán)格按SOP進(jìn)行各項(xiàng)無(wú)菌操作,詳見(jiàn)<藥品微生物檢驗(yàn)學(xué)手冊(cè)>308頁(yè), :檢驗(yàn)員應(yīng)在無(wú)菌操作的基礎(chǔ)上,盡量提高操作的準(zhǔn)確性,進(jìn)一不提高檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性
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